Добавка НейроМакс, 50×, стерильная, 10 мл
Добавка B-27
Представляет собой стерильную бессывороточную пятидесятикратную добавку для оптимизации питательных сред, специально разработанную для культивирования клеток нервной ткани. Содержит комплекс витаминов, антиоксидантов, гормонов, липидов, альбумина, инсулина и трансферрина.
Препарат: Прозрачная жидкость светло-желтого цвета без опалесценции.
Назначение: Используется для оптимизации базовых рецептур сред (рекомендуемая основа – среда «Нейробазальная», Neurobasal™ Medium), предназначенных для поддерживающего и длительного культивирования клеток нервной ткани центральной и периферической нервной системы. Эффективна для культивирования нейронов гиппокампа и ретинальных ганглиев, эмбриональных и пренатальных нейробластов, нейронов взрослого человека, первичных культур и клеточных линий опухолевых тканей нервной системы.
Способ применения:
-
Одного флакона продукта (10 мл) достаточно для оптимизации 500 мл среды. Перед использованием, продукт размораживают в течение ночи при 4 °С; Описанная процедура тестирования была применена с целью культивирования нейронов гиппокампа и коры мозга 18-дневного эмбриона крысы, а также клеточных линий нейробластомы;
-
Покрыть поверхность культуральной емкости адгезивом: стерильный водный раствор поли-D-лизина 0,05 мг/мл из расчета 0,15 мл/см² (выдержать 1 час при комнатной температуре);
-
Удалить раствор адгезива и дважды ополоснуть поверхность стерильной деионизованной водой. Полностью подсушить емкости в ламинарном шкафу. Использовать сразу или хранить в холодильнике до 2 недель;
-
Изолировать первичные нейроны крысы или использовать культуру замороженных нейронов согласно стандартным лабораторным протоколам;
-
Осуществить пассаж клеток в преинкубированной или прогретой при 37 °С полной среде Нейробазальная. Рекомендуемая плотность пассажа ~160 кл./см² (для нейронов гиппокампа используется полная среда с добавлением 25 мкМ L-Глутамата);
-
Инкубировать сосуды при 37 °С в стандартных условиях СО₂-инкубатора. Предпочтительно снижение парциального содержания кислорода до 9%;
-
Через 4–24 часа заменить ½ среды свежей;
-
В случае негиппокампальной культуры нейронов: через 4 дня после пассажа заменить ½ среды свежей. Для гиппокампальной культуры нейронов: через 3 дня после пассажа заменить ½ среды свежей без L-глутамата. С периодичностью в 3 дня повторять процедуру. Введение 25 мкМ 2-меркаптоэтанола увеличивает выживаемость и сроки культивирования нейронов гиппокампа in vitro.
Условия хранения: Хранить при температуре ‒10 °C…‒20 °C в защищенном от света месте. Транспортировать в замороженном состоянии.
Данный продукт предназначен для исследовательских целей
