Среда "Амниокар"

Среда «Амниокар» предназначена для культивирования клеток амниотической жидкости и клеточных элементов хориона in vitro с использованием «In situ» или «Flask» методов с целью получения обогащенной популяции делящихся клеток и последующего анализа метафазных хромосом. Среда «Амниокар» высокоэффективна при культивировании фибробластов, мезенхимальных стволовых клеток (МСК) и других клеток мезенхимального происхождения.

Инструкция Амниокар

Регистрационное Удостоверение Амниокар

Среда «Амниокар» предназначена для использования в лечебно-профилактических, диагностических и научно-исследовательских учреждениях.

Среда является вспомогательным средством для диагностики in vitro, предназначена для культивирования клеток амниотической жидкости для цитогенетического анализа, а также культивирования фибробластов и других клеток мезенхимального происхождения в лабораторных целях.

Материалом для культивирования служат клетки амниотической жидкости, клеточные элементы хориона, фибробласты и другие клетки мезенхимального происхождения.

Остановка митотического деления с последующим накоплением метафазных пластин достигается инкубацией клеток с колхицином. Для анализа клетки переводят в гипотонический раствор хлористого калия, фиксируют, наносят на предметное стекло и окрашивают, согласно общепринятым методикам.

СПОСОБ ПРИМЕНЕНИЯ:

Перед непосредственным применением среду следует разморозить. Размораживание должно происходить естественным путём в холодильной камере при температуре от +2 до +8°С. Запрещена ускоренная разморозка среды и оттаивание при температуре 37°С. Рекомендуется избегать многократных циклов замораживания-оттаивания.

После размораживания и перемешивания среда представляет собой прозрачную жидкость красно-розового цвета.

1. Приступая к работе, содержимое каждого флакона аккуратно перемешать, путём бережного переворачивания флакона.
2. Вскрытие флакона и последующие манипуляции следует производить в асептических условиях.
3. 10 мл свежеполученной (хранение не более 4 - 8 часов при температуре от 30 до 37 °С) амниотической жидкости центрифугировать при 1000 об/мин в течение 10 мин.
4. Супернатант отобрать и удалить, оставляя 1 - 2 мл надосадочной жидкости.
5. Осадок клеток аккуратно ресуспендировать, добавить 5 мл Среды «Амниокар», осторожно перемешать и весь объем жидкости перенести в вентилируемый культуральный флакон с площадью дна 25 см².
6. Культивирование клеток проводят в СО₂ инкубаторе в течение 9 - 12 суток при температуре - 37 0,5 °С, концентрация СО₂ - 5%.
7. На 5 сутки в культуральный флакон добавить свежую порцию Среды «Амниокар» в количестве ½ объема культуральной среды.
8. Остановку митотического деления клеток осуществляют путем обработки культуры клеток колхицином (концентрация 1 мкг/мл, инкубация в течение 60 мин).
9. Снятие клеток с поверхности пластика проводят согласно общепринятым методикам.

10. Для анализа полученные суспензии клеток осаждают центрифугированием (1000-1500 об/мин в течение 10 мин). Затем клетки обрабатывают гипотоническим раствором, фиксируют, готовят препараты и окрашивают согласно общепринятым методам.

ФОРМА ВЫПУСКА: Препарат выпускают в пластиковых флаконах (ПЭТ-таре) по 60, 100 или 500 мл, которые герметично укупорены. Еврофлаконы имеют широкое, удобное для работы горло.

Срок годности: 1 год.

Хранить: в защищенном от света месте при температуре от -10 до -20°С.